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高效液相色譜儀原理詳盡解析

發布時間:2021-06-02


   高效液相色譜 (HPLC) 是分析化学中的一种技术,用于分离混合物中的成分,并识别和量化每种成分。我们在实验过程中总是出现很多问题,但是又不知道怎么解决,如果你了解其中的原理就很容易排除故障原因,以下为大家详尽解说高效液相色谱仪每个部件的原理。



HPLC的發展導致了泵系統的發展。
泵位于液相色譜系統的最上遊,並産生從溶劑容器到系統的洗脫液流。
高壓産生是泵的“標准”要求,除此之外,它還應能夠在任何條件下提供穩定的壓力以及可控制和可再現的流量。
當前LC系統中使用的大多數泵都是通過電動機驅動的活塞(往複泵)來回運動來産生流量的。由于這種活塞運動,它會産生“脈沖”。


注射器

噴油器放置在泵旁邊。
最簡單的方法是使用注射器,然後將樣品引入洗脫液流中。
最廣泛使用的進樣方法是基于采樣環。
自動進樣器(自動進樣器)系統的使用也得到了廣泛使用,它允許按設定的定時進行重複進樣。 


柱子

分離在塔內進行。
最近的色譜柱通常在不鏽鋼外殼中而不是玻璃色譜柱中制備。
與碳酸鈣相比,通常使用的填充材料是二氧化矽或聚合物凝膠。
用于LC的洗脫液從酸性到堿性溶劑不等。
大多數色譜柱外殼均由不鏽鋼制成,因爲不鏽鋼可耐受多種溶劑。


探測器

分析物的分離在色譜柱內部進行,而檢測器用于觀察獲得的分離。
當不存在分析物時,洗脫液的組成是一致的。而分析物的存在會改變洗脫液的組成。檢測器的作用是測量這些差異。
該差異作爲電子信號的形式被監視。有不同類型的檢測器可用。


錄音機

檢測器檢測到的洗脫液變化是電子信號的形式,因此我們的眼睛仍然看不見。
在較早的時期,筆(紙)圖表記錄器被廣泛使用。如今,基于計算機的數據處理器(集成商)更爲普遍。
有各种类型的数据处理器。包括内置打印机和文字处理器的简单系统,以及专门为LC系统设计的软件,不仅具有数据采集功能,而且还具有峰拟合,基线校正,自动浓度计算,分子量测定等功能。 。


脫氣機

用于LC分析的洗脫液可能包含我們的眼睛不可見的氣體,例如氧氣。
當洗脫液中存在氣體時,會將其檢測爲噪音並導致基線不穩定。
脫氣機使用特殊的聚合物膜管去除气体。
聚合物管表面上的許多非常小的孔允許空氣通過,同時防止任何液體通過該孔。


柱加熱器

LC分離通常受色譜柱溫度的很大影響。
爲了獲得可重複的結果,保持一致的溫度條件很重要。
同樣對于某些分析(例如糖和有機酸),在升高的溫度(50至80°C)下可以獲得更好的分離度。
因此,通常将色谱柱保存在色谱柱箱(柱加熱器)内。

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